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色谱那些事(第十五期):死体积与滞留(延迟)体积

本期内容将为您介绍:死体积与滞留(延迟)体积

死体积定义

死体积狭义上指色谱柱中未被固定相占据的空隙体积,即色谱柱内流动相的体积。其实广义上的死体积是指进样位置(进样口)到检测位置(检测器流通池)这一段的体积(PS:除去色谱柱中填料体积),一旦色谱柱连接,这段体积(图示红色管路)是不变的(死的)。

注意事项

死体积越大,样品扩散的空间很大,色谱峰会更容易展宽,峰形变差。在蜜桃成人网站入口使用或维护的过程中,如果涉及管路等配件的更换,应该选择与原规格一致的配件,以确保死体积等与原来一致,避免死体积的增加而带来峰形的展宽。

接装色谱柱时,需确保管线接头匹配完好(特别注意peek管接头的使用,以及管线与色谱柱的连接处)避免形成接头空腔(如下图)。

滞留(延迟)体积

滞留(延迟)体积一般指从混合器到色谱柱入口之间的体积(下图绿色管线部分)。混合器一般为四元低压泵的比例阀和二元高压的混合器,位于泵模块。滞留(延迟)体积越小,更改流动相比例后,可以快速应用到色谱柱上,从而影响色谱柱中流动相比例的变化。

注意事项

等度模式:由于流动相比例无变化,所以滞留(延迟)体积对分离度没有影响。

梯度模式:滞留(延迟)体积的大小会直接影响梯度的变化,从而影响到出峰时间和分离度。

梯度模式时,无论是滞留(延迟)体积发生了变化(使用不同品牌仪器,或更换与原来不一致的管线),还是更换了不同规格的色谱柱,即使相同的方法设置,如果想要获得与原来一致的分离效果,还需要对方法进行优化。

往期回顾:

第十四期:进样六通阀的使用及保养

第十三期:系统漏液故障的解决(下)

第十二期:系统漏液故障的解决(上)

第十一期:有效预防泵故障

第十期:液相系统压力异常(2)

第九期:液相系统压力异常(1)

第八期:有效延长色谱柱的寿命(下)

第七期:糖分析常用色谱柱

第六期:糖系统检测器-ELSD & RID

第五期:有效延长色谱柱的寿命第四期:色谱柱的压力限制

第三期:氨基柱的使用

第二期:色谱柱对液相系统的要求

第一期:硅胶基质和聚合物基质色谱柱的保存

文章来源:KNAUER 色谱课堂 LUMTECH绿绵科技

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